Resumen Desde inicios del decenio de 1990 y de manera casi simultánea, se empezaron a observar afecciones desconocidas en numerosos cultivos, sobre todo en regiones tropicales y subtropicales. Dichas enfermedades eran causadas por begomovirus hasta entonces poco estudiados. Su vector es la mosca blanca Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae), de la que no se habían registrado poblaciones tan desmedidas en áreas agrícolas. Ello originó una seria crisis de producción a nivel mundial, con pérdidas millonarias para los agricultores de numerosos países, incluyendo la región de Mesoamérica. Por fortuna, en Costa Rica, algunos centros de investigación, con la colaboración de especialistas extranjeros, han podido profundizar en las causas de este fenómeno, para buscar soluciones fundamentadas en información de carácter epidemiológico. Además de la especie de B. tabaci New World (NW), nativa y previamente conocida, en años recientes han ingresado sendas especies del Mediterráneo (MED) y el Medio Oriente-Asia Menor 1 (MEAM1). Asimismo, se ha detectado la presencia de begomovirus bipartitas, nativos y exóticos, especialmente en frijol común, cucurbitáceas, tomate y chile; además, se detectó el begomovirus monopartito conocido a nivel mundial Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) en tomate. Con base en el conocimiento biológico y ecológico acumulado hasta ahora, en la presente revisión se aporta una panorámica del dinamismo con que se han expresado en Costa Rica las interacciones entre las diferentes especies vectoras y los distintos begomovirus, con énfasis en patosistemas de hortalizas. Se espera que la información aquí presentada permita mejorar el tipo de respuestas prácticas y eficaces de parte de agricultores, extensionistas agrícolas e investigadores involucrados en la producción de hortalizas, frente a problemas actuales o imprevistos.

Abstract Since the early 1990s, and almost simultaneously, unknown diseases started to be observed in many crops, especially in tropical and subtropical regions. These diseases were predominantly caused by begomoviruses, which were poorly known at that time. Their vector, the whitefly Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae), often reached unprecedented huge populations in agricultural areas. This elicited a serious production crisis worldwide, that caused losses of millions of dollars for farmers in many countries, including the Mesoamerican region. Fortunately, in Costa Rica, some local research centers, with the collaboration of foreign specialists, have been able to study the causes of this phenomenon, in the search for solutions based on solid epidemiological information. In addition to the previously reported native Bemisia tabaci species, New World (NW), two exotic species, -Mediterranean (MED) and Middle East-Asia Minor 1 (MEAM1)- were found. Moreover, native and exotic bipartite begomoviruses have been detected, especially in common bean, cucurbits, tomato and sweet pepper, as well as the worldwide spread monopartite begomovirus Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV). Based upon biological and ecological knowledge accumulated to date, this review offers a comprehensive overview of the very dynamic ways in which the interactions of the different whiteflies and begomovirus species have expressed in Costa Rica, with emphasis on vegetable pathosystems. Hopefully, the information provided in this paper may allow farmers, extension agents, and researchers involved in vegetable production to develop sound practical responses to current and unforeseen problems regarding whiteflies and their associated viruses.

RESUMO: A associação de alguns vírus fitopatogênicos com seus vetores pode ou não alterar a ação do controle químico. Este trabalho objetivou avaliar a suscetibilidade de moscas-brancas virulíferas (com aquisição do begomovirus Tomato severe rugose virus, ToSRV) e avirulíferas (sem aquisição do ToSRV) aos principais inseticidas registrados para o seu controle na cultura do tomateiro. Foram realizados ensaios com plantas de tomateiro e discos foliares de feijão-de-porco. Os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial de 7 (seis inseticidas + controle) e de 5 (quatro inseticidas + controle) x 2 {mosca-branca (MB) virulífera (V) ou avirulífera (AV)} e dispostos no delineamento em blocos ao acaso com seis e 25 repetições para o tomateiro e feijão-de-porco, respectivamente. Os inseticidas e concentrações avaliados foram: a) tomateiro: acefato (100 g), clotianidina (20 g), pimetrozina (40 g), piriproxifem (75 mL) e tiametoxam (20 g de i.a./100 L de calda) e diafentiurom (800 g de i.a./300 L de calda); b) feijão-de-porco: acefato (100 g), tiametoxam (20 g), pimetrozina (40 g de i.a./100 L) e diafentiurom (800 g de i.a./300 L de calda). Não houve diferença na suscetibilidade do vetor em razão de sua condição (V ou AV). Os inseticidas diafentiurom (87,68%±4,96) e tiametoxam (43,95%±9,43) proporcionaram maior mortalidade de MB no tomateiro, enquanto no feijão-de-porco diafentiurom (92,01%±2,68) e tiametoxam (86,39%±2,74) apresentaram desempenho similar. Diafentiurom foi o único inseticida que proporcionou controle satisfatório de B. tabaci em ambos os ensaios avaliados.

ABSTRACT: The association between some plant pathogenic viruses and their vectors may or may not alter the action of chemical control. This study aimed at evaluating the susceptibility of viruliferous (transmitter of the begomovirus Tomato severe rugose virus, ToSRV) and aviruliferous (non-transmitter of ToSRV) Bemisia tabaci biotype B to the main insecticides registered to its control in tomato crops. Two sets of experiments were carried out with tomato plants and foliar discs of jack beans. The treatments were schemed in a factorial design of 7 (six insecticides + control) and 5 (four insecticides + control) x 2 {viruliferous (V) or aviruliferous (AV) whiteflies (WF)} and arranged in completely randomized blocks design with six and 25 replications, respectively, for tomato and jack beans. The following insecticides and concentrations were evaluated: a) tomato: acephate (100 g), clothianidin (20 g), pymetrozine (40 g), pyriproxyfen (75 mL) and thiametoxan (20 g of a.i./100 L), and diafenthiuron (800 g of a.i./300 L of solution); b) jack beans: acephate (100 g), thiametoxan (20 g), pymetrozine (40 g of a.i./100 L) and diafenthiuron (800 g of a.i./300 L). The insecticide susceptibility of whiteflies was not altered by their viruliferous condition (V or AV). The insecticides diafenthiuron (87.68%±4.96) and thiametoxam (43.94%±9.43) caused the highest mortality of whiteflies in tomatoes. In jack beans, diafenthiuron (92.01%±2.68) and thiametoxam (86,39%±2,74) caused similar mortality. Among the tested insecticides, diafenthiuron was the only one causing significant mortality of B. tabaci biotype B.

RESUMO: Os vírus transmitidos por insetos causam algumas das doenças mais severas e economicamente mais importantes em culturas agrícolas, especialmente em regiões tropicais e subtropicais. Os geminivírus, um grupo único de vírus de DNA de fita simples com partículas icosaédricas e geminadas, são responsáveis por muitas dessas doenças. De particular importância são os geminivírus transmitidos por moscas-brancas (Bemisia tabaci), que pertencem ao gênero Begomovirus. Esse é o maior gênero de vírus de plantas (em termos de número de espécies), sendo que alguns dos begomovírus causam inúmeras doenças devastadoras em hortaliças e plantas produtoras de fibras em todo o mundo. Esta revisão apresenta o conhecimento atual sobre os begomovírus, as begomoviroses e as estratégias de manejo dessas doenças. Ênfase é colocada nas principais begomoviroses que ocorrem no Brasil, que são aquelas que afetam o feijoeiro e tomateiro. Entretanto, devido ao amplo círculo de hospedeiros do vetor e da flexibilidade genética dos begomovírus, as begomoviroses representam ameaças a diversas culturas. Assim, discute-se também a situação atual das begomoviroses em batata, batata-doce, pimenta, quiabo e soja no Brasil.

ABSTRACT: Insect-transmitted viruses cause some of the most damaging and economically important diseases of crop plants, especially in tropical and subtropical regions. The geminiviruses, a group of single-stranded DNA viruses with unique twined icosahedral virus particles, are responsible for many of these diseases. Of particular importance are the geminiviruses transmitted by whiteflies (Bemisia tabaci), which are in the genus Begomovirus. This is the largest genus of plant viruses (in terms of number of species), and some are responsible for many devastating diseases in vegetable and fiber crops throughout the world. This review presents the current understanding of begomoviruses, the diseases they cause, and approaches for disease management. An emphasis is placed on the most important begomovirus diseases in Brazil, which are those that affect common bean and tomato. However, because of the wide host range of the vector and the genetic flexibility of begomoviruses, these diseases pose a threat to many other crops. Therefore, the current situation with begomoviruses that infect okra, pepper, potato, sweetpotato and soybean in Brazil is also discussed.

A mancha-bacteriana e a begomovirose são exemplos de doenças importantes em tomate para processamento industrial no Brasil em que a disponibilização de cultivares com resistência é extremamente desejável. No presente trabalho foram conduzidos três ensaios (2010 e 2011) para avaliar híbridos comerciais e experimentais de tomate para processamento industrial em campo, com ocorrência de begomovirose (ensaios 1 e 3) e de mancha-bacteriana (ensaios 2 e 3). O delineamento experimental em 2010 foi blocos ao acaso e, em 2011, blocos ao acaso com parcelas subdivididas, cabendo à parcela a inoculação de Xanthomonas perforans e/ou X. gardneri (com e sem) e, à subparcela, os híbridos. A infecção por begomovírus foi natural. A severidade de ambas as doenças foi mensurada por atribuição visual de notas. Foi calculado a estimativa do efeito relativo de tratamento para severidade das doenças quando tomada em uma única avaliação (ensaios 1 e 2) e a Área Abaixo da Curva de Progresso da Mancha-bacteriana (AACPMab) para a severidade estimada em quatro datas (ensaio 3). Avaliou-se ainda a produtividade nos três ensaios. Foram observadas diferenças significativas entre os híbridos em relação à severidade das doenças estudadas (três ensaios) e produtividade (ensaios 2 e 3). Os híbridos BRS Sena, HF1-50 e BQ-210 tiveram melhor comportamento em relação à begomovirose no ensaio 1. Para a mancha-bacteriana (ensaio 2), sete híbridos tiveram estimativa do efeito relativo (ER) de tratamento inferior a 0,50, porém com muita sobreposição entre os intervalos de confiança. A produtividade variou de 33,7 (BQ 145) a 56,5 t/ha (BRS Sena). No ensaio 3, o híbrido BRS Sena novamente colocou-se entre os materiais com melhor desempenho para begomovirose, enquanto, em conjunto com os híbridos CVR 54, BA 5446 e HMX 7889, apresentou AACPMab significativamente menor que os materiais mais suscetíveis. Em seis híbridos a mancha-bacteriana reduziu significativamente (41,4% em média) a produtividade, que variou de 95,8 (AP 533) a 138,0 t/ha (BA 5446).

Begomoviruses and bacterial spot are examples of important limiting yield factors for the processing tomato crop in Brazil in which the availability of resistant cultivars is strongly welcome. Three field trials were carried out in 2010 and 2011 to evaluate commercial and experimental processing tomato hybrids under begomovirus (trial 1) and bacterial spot (trials 2 and 3) pressure. Blocks at random were used in trials 1 and 2 (2010), while trial 3 (2011) was carried out in a split-plot randomized blocks design, where Xanthomonas perforans and/or X. gardneri inoculation (yes or no) was tested in main plots and hybrids, in sub-plots. Begomovirus infection was natural. Both diseases were assessed independently by using visual severity rates. Whenever diseases were assessed in a single evaluation (trials 1 and 2), we estimated the treatment relative effect for disease severity (ER); while for multiple evaluations (bacterial spot, trial 3), we calculated the Area Under the Bacterial Spot Progress Curve (AUBSPC). Yield data were also taken. Significant differences were detected for disease severity in the three trials and for yield in trials 2 and 3. Hybrids BRS Sena, HF1-50, and BQ-210 performed better for resistance to begomoviruses in trial 1. For bacterial spot (trial 2), seven hybrids had estimated relative effet lower than 0.50, but with intense confident interval overlapping among hybrids. Yields varied from 33.7 (BQ 145) to 56.5 t/ha (BRS Sena). In trial 3, BRS Sena performed again among the most resistant to begomovirus, and along with CVR 54, BA 5446, and HMX 7889 showed an AUBSPC significantly lower than those of the most susceptible hybrids. In six hybrids the bacterial spot significantly reduced yield (41.4% in average), which varied from 95.8 (AP 533) to 138.0 t/ha (BA 5446).

Tomato chlorosis virus (ToCV), a species in the Crinivirus genus, was first reported in tomatoes in Brazil (state of São Paulo) in 2008. This was followed by reports in several other Brazilian states. Tomato plants with chlorotic spots and leaf roll symptoms are frequently observed in tomato fields with high whitefly populations in Central Brazil. These plants could be infected with a begomovirus, a crinivirus, or with both viruses. A survey of two selected tomato fields in the Federal District and Goiás State was conducted in 2012 and 2013 specifically to determine the occurrence of begomoviruses and criniviruses. A total of 150 samples were collected and subjected to RT-PCR for ToCV detection and PCR for begomovirus detection. About 48% of the tested plants were infected with both viruses, 32% were infected with ToCV alone and 20% were only infected with the begomovirus ToSRV. The increasing incidence of ToCV associated with high whitefly populations in the field highlights the need for studying this virus disease to clarify its impact on tomato crops and minimize its potential damage.

Tomato chlorosis virus (ToCV, genus Crinivirus, family Closteroviridae) is a whitefly-transmitted crinivirus with a bipartite RNA genome. This virus is emerging as a serious threat to tomato crops worldwide. To date, only three complete genomic sequences of ToCV have been described from North America, Spain, and Greece isolates. In this study, we present the fourth complete nucleotide sequence of the RNA 1 (8594 nt) and RNA 2 (8242 nt) components of a Brazilian ToCV isolate (ToCV-BR). The complete genome sequences of RNA 1 and RNA 2 have been deposited in the GenBank database under the accession numbers JQ952600 and JQ952601, respectively. The sequences of RNA 1 and RNA 2 shares the highest nucleotide identity of 99.6% and 99.5%, respectively, with the Greek isolate sequences. Phylogenetic analysis confirmed that both RNA 1 and RNA 2 of the Brazilian isolate are most closely related to the Greek isolate of that virus. These results suggest that ToCV may have been recently introduced to Brazil from Europe.

A ocorrência do Pepper mild mottle virus (PMMoV) em plantas de Capsicum tornou-se frequente no Brasil. Apesar da importância desse vírus, informações genômicas de isolados sul-americanos são ainda escassos. Neste trabalho, foi elucidada a sequência do genoma completo de um isolado brasileiro de PMMoV (BR-DF01) e esta foi comparada a outras sequências de PMMoV. A sequência de nucleotídeos do genoma completo do isolado BR-DF01 apresentou a maior identidade (99,54%) com o isolado japonês JP-J, que é capaz de contornar a resistência do gene L3 de plantas de Capsicum, como foi também observado para BR-DF01. A sequência de amino ácidos da capa protéica (CP) desses dois isolados foi idêntica, sugerindo que a CP é o fator-chave para a quebra de resistência baseada no gene L. Análises filogenéticas indicaram que BR-DF01 e isolados de PMMoV pertencentes ao agrupamento I, incluindo o isolado JP-J, podem compartilhar de um ancestral em comum.

Occurrence of Pepper mild mottle virus (PMMoV) on Capsicum plants has become common in Brazil. Despite the importance of this virus, genome information is still lacking for South American isolates. In this report, the first complete genome sequence of a Brazilian isolate of PMMoV (BR-DF01) was elucidated and compared with other PMMoV sequences. The nucleotide sequence of the complete genome of BR-DF01 isolate shared the highest nucleotide identity (99.54%) with the Japanese isolate JP-J, which does not overcome L3 resistance gene of Capsicum plants, as also observed for BR-DF01. The coat protein (CP) amino acid sequence of these two isolates was identical, which suggested that CP is the key factor for L-based resistance breaking. Phylogenetic analysis implied that BR-DF01 and PMMoV isolates belonging to Cluster I, including JP-J isolate, may share a common ancestral origin.

As viroses causam rápida degenerescência dos tubérculos-sementes de batata. Em condições tropicais, em que a presença de afídeos vetores é constante e a estrutura das populações de vírus é dinâmica, a pressão das doenças é enorme. Conhecer essa dinâmica é uma ferramenta importante para a sustentabilidade da produção de batata. Realizou-se um levantamento abrangente da ocorrência de viroses em batata no Brasil, além de estudar-se a distribuição das estirpes de Potato virus Y (PVY) associadas ao mosaico da batata. Em 2005 e 2006 foram visitadas lavouras em sete estados brasileiros, coletando-se folíolos com sintomas de viroses (1.256 amostras) e amostras aleatórias (360 amostras). Foi feita também uma estimativa visual da incidência de mosaico e enrolamento-das-folhas em vários dos campos visitados. Das 1.256 amostras suspeitas, 840 apresentaram reação positiva em teste sorológico para PVY (66,9%), 128 para Potato leaf roll virus (PLRV) (10,2%), 79 para Potato virus S (PVS) (6,3%) e nenhuma para Potato virus X (PVX). Os resultados dos testes de detecção por DAS-ELISA, biológico e RT-PCR mostraram a presença quase absoluta do subgrupo necrótico de PVY, em sua maioria PVY NTN. A análise de uma sub-amostragem em todos os municípios visitados confirmou que essa variante está hoje presente nos sete estados visitados. Amostras de PVY NTN foram obtidas das cultivares Asterix, Atlantic, Agata, Achat, Baronesa, Baraka, Bintje, Caesar, Cupido, Marijke, Monalisa, Panda e Vivaldi, que apresentaram diferentes níveis de suscetibilidade. As amostras aleatórias revelaram um quadro muito similar ao encontrado com as amostras sintomáticas. PLRV foi identificado em MG, BA, PR e SC, em várias lavouras de forma muito freqüente. PVS foi identificado nesses mesmos estados e também em SP. PVX foi detectado em apenas uma amostra tomada ao acaso em Serra do Salitre (MG). O contraste entre a avaliação visual dos sintomas e os resultados do teste de detecção por ELISA revelou a possibilidade de infecção latente por PVY em níveis relevantes na cultivar Asterix.

Viruses are responsible for the quick degeneration of potato seed-tubers. In the tropics, where aphid vectors are constantly present and the structure of virus populations is dynamic, the disease pressure is enormous. Therefore, the knowledge of such dynamics is definitely an extremely valuable tool towards the sustainability of the national potato production. In this study, we report a broad survey of virus occurrence in potato, in Brazil. In addition, we studied the distribution of the Potato virus Y (PVY) strains associated with mosaic symptoms on potatoes. In 2005 and 2006, we visited potato fields in seven Brazilian States. We collected leaves of symptomatic plants (1,256 samples) and also at random (360 samples). In addition, in several fields a visual assessment was carried out to estimate mosaic and leafroll incidence. From the 1,256 samples with symptoms, 840 tested serologically were positive to PVY (66.9%), 128 to PLRV (10.2%), 79 to PVS (6.3%), and none to PVX. Serology using DAS-ELISA and also biological and RT-PCR tests revealed an almost exclusive occurrence of the PVY necrotic strain, predominantly the necrotic subgroup PVY NTN. The analysis of a sub-sample representing all surveyed Counties indicated that the necrotic strain was universally present. Cultivars Asterix, Atlantic, Agata, Achat, Baronesa, Baraka, Bintje, Caesar, Cupido, Marijke, Monalisa, Panda, and Vivaldi, although displaying different susceptibility levels, were all infected by PVY NTN. The analysis of leaves collected at random showed similar results. PLRV was identified in four States (Minas Gerais, Bahia, Paraná, and Santa Catarina), while PVS was present in the State of São Paulo as well. PVX was found in only one sample collected at random in Serra do Salitre, State of Minas Gerais. The contrast between visual evaluation and the results of the detection test by ELISA strongly indicated the presence of a relevant rate of PVY latent infection on cultivar Asterix.

O Nordeste é a principal região produtora de melão do País, contribuindo com mais de 90% da produção nacional. Entretanto, o "amarelão do meloeiro", doença associada à presença de um novo vírus, o Melon yellowing-associated virus (MYaV), vem afetando a cultura desde 1999. Este trabalho teve como objetivo detectar a ocorrência do MYaV em meloeiros exibindo sintomas suspeitos da doença nos estados que são os maiores produtores da Região Nordeste. Em novembro de 2007, plantios comerciais de melão foram inspecionados para avaliar a ocorrência do "amarelão". Um total de 374 plantas foi coletado em áreas produtoras dos estados do RN (54) e CE (37) e também, do Submédio do Vale do São Francisco (283), situado nos Estados da BA e PE. A detecção do MYaV nas amostras foi realizada por DAS-Elisa utilizando-se anticorpos policlonais desenvolvidos pela Embrapa Hortaliças. Extratos preparados a partir de folhas e de hastes das plantas coletadas foram utilizados como antígeno. O MYaV foi detectado em 58,0% do total de plantas avaliadas, sendo que a concentração viral foi maior em hastes do que em folhas. A quantidade de plantas infectadas foi maior em amostras coletadas no RN (96,3%) e CE (75,7%) que no Submédio do Vale do São Francisco (PE e BA, com 48,4%). Estes resultados revelaram a ampla disseminação do MYaV nas principais áreas produtoras de melão da Região Nordeste e demonstraram a eficiência dos anticorpos na detecção viral.

The Northeast Region of Brazil is the main melon-producing region of the country, being responsible for more than 90% of the total national production. A new disease, known as "yellowing of melon plants", which has been associated to a new viral agent, the Melon yellowing-associated virus (MYaV), has been reported to cause damage on this crop since 1999. In this study we evaluated the occurrence of the MYaV in melon plants exhibiting suspicious symptoms of the disease in major melon growing states of the Northeast region. In November 2007, commercial melon fields were inspected for the occurrence of this virus. A total of 374 plants was collected in melon fields of the States of Rio Grande do Norte (54) and Ceará (37) and in the Submédio do Vale do São Francisco (283), in Bahia and Pernambuco States. Sample evaluation was performed by DAS-Elisa using polyclonal antibodies developed at the Embrapa Hortaliças for MYaV detection. Extracts prepared from leaves and stems of symptomatic plants were used as antigen. The MYaV was detected in 58.0% of the collected samples. Interestingly, the virus concentration was higher in stems than in leaves. The incidence of MYaV was higher in samples collected from Rio Grande do Norte (96.3%) and Ceará (75.7%) fields than from those in the Submédio do Vale do São Francisco (Pernambuco and Bahia, with 48.4%). These data confirmed the widespread occurrence of the virus in melon fields of the main melon-producing areas of Northeastern Brazil and the efficiency of the antibody for MYaV detection.

A doença conhecida como "Amarelão do Meloeiro" é hoje uma das principais doenças em meloeiro no Nordeste do Brasil. Até o momento, somente o Melon yellowing-associated virus (MYaV), transmitido por moscas-brancas, foi detectado em plantas doentes e constitui-se no provável agente causador da doença. Para permitir uma diagnose inequívoca da doença, este trabalho objetivou a produção e avaliação de anti-soro policlonal contra o isolado "Bessa" de MYaV. Partículas virais foram purificadas e injetadas em coelhos para a produção do anti-soro, que mostrou ser específico sem a ocorrência de reações com extrato de plantas sadias e outros vírus que infectam o melão. Para a avaliação do anti-soro, 14 amostras de meloeiro com sintomas de amarelão oriundas de campos de produção de Pernambuco e Rio Grande do Norte foram avaliadas em DAS-Elisa. Onze amostras reagiram positivamente e verificou-se que a concentração viral maior é vista na haste e não nas folhas, sendo o tecido a ser selecionado para a realização de testes de detecção. Esse estudo demonstrou que o anti-soro policlonal produzido contra o MYaV é específico e poderá ser utilizado na detecção desse vírus em plantios comerciais de melão.

Today, the disease known as "Melon yellowing" is one of the major melon diseases in melon growing areas in the Northeast of Brazil. Up to the moment, only the Melon yellowing-associated virus (MYaV), transmitted by whiteflies, was detected in diseased plants, and it is the probable causing agent of the disease. To enable the unequivocal diagnosis of the disease, this study aimed to produce and evaluate a polyclonal antibody against the "Bessa" isolate of MYaV. Viral particles were purified and injected into rabbits for antiserum production, which was specific without any reaction with healthy plant sap. For antiserum evaluation, 14 melon samples with yellowing symptom from fields of Pernambuco and Rio Grande do Norte were evaluated by DAS-Elisa. A total of eleven samples reacted positively and the test showed that the virus concentration is higher at the stems instead of leaves, and therefore stems should be selected to be used in detection tests. This study demonstrated that the polyclonal antiserum produced against MYaV was specific and can be used to detect it in commercial melon fields.

Várias doenças ameaçam a produção de tomate, especialmente aquelas causadas por vírus dos gêneros Begomovirus, Tospovirus e Potyvirus. Uma análise de amostras foliares de tomateiro para detecção dos vírus de maior importância no Distrito Federal foi realizada utilizando-se as técnicas de PCR e DAS-ELISA. Em um total de 54 amostras avaliadas, o vírus mais prevalente foi o Pepper yellow mosaic virus, um potyvírus responsável por sérias perdas em áreas de produção de pimentão no Brasil. Este resultado reforça a crescente importância deste vírus na produção de tomate. Os sintomas causados por PepYMV são muito similares àqueles causados por begomovírus, portanto é recomendada que uma técnica de detecção apropriada seja utilizada em adição à avaliação visual de sintomas.

Various diseases threaten tomato production; especially those caused by viruses of the genera Begomovirus, Tospovirus and Potyvirus. A survey on the major viral diseases occurring on tomatoes in the Federal District was carried out using PCR and DAS-ELISA. Out of 54 evaluated samples, the most prevalent virus was Pepper yellow mosaic virus, a potyvirus responsible for heavy losses in sweetpepper production in Brazil. This result highlights the increasing importance of this virus on the tomato crop. Since the symptoms caused by PepYMV infection are similar to those caused by begomoviruses, the use of a proper detection technique is recommended in addition to visual evaluation of symptoms.

Devido às falhas encontradas no método de inoculação de begomovírus em plantas de tomateiro, um método eficiente e confiável de inoculação de begomovírus foi desenvolvido utilizando como vetor a mosca-branca (Bemisia tabaci). A aquisição viral foi realizada em uma armadilha ('Tube-cage') feita a partir de um tubo de polipropileno contendo moscas-brancas de um ou dois dias de idade e o ápice de uma planta de tomate infectada com um begomovírus. Após 48 horas de período de aquisição, procedeu-se à inoculação utilizando-se uma armadilha em forma de anel ('Ring-cage') contendo as moscas-brancas virulíferas. A armadilha foi colocada na parte abaxial das folhas de plântulas de tomateiro. Após o período de inoculação de 48 horas, as moscas-brancas foram eliminadas e as plantas inoculadas foram incubadas por 28 dias em casa-de-vegetação. Utilizando-se este método três moscas-brancas virulíferas por planta foram suficientes para causar infecção em tomateiro susceptível cv. Viradoro. Este procedimento foi aplicado para avaliar a resistência de tomateiro linhagem 486-1 (resistente) em comparação com 'Viradoro'. Hibridização por dot-blot confirmou a susceptibilidade de 'Viradoro' e a resistência da linhagem 486-1, mostrando a utilidade deste método na seleção de plantas resistentes. Este método também permitiu a avaliação da presença do vírus nas folhas inoculadas e em folhas superiores não inoculadas, indicando que o mecanismo de resistência da linhagem 486-1 poderá estar atuando nas folhas inferiores inoculadas, não havendo translocação viral para as folhas superiores.

Due to failures of infection after mechanical inoculation of begomovirus on tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) plants, an efficient and reliable begomovirus inoculation method was developed using the whitefly vector (Bemisia tabaci). Virus acquisition was carried out using a 'Tube-cage', made of a polypropylene tube, containing one to two day-old whiteflies and a tomato plant apex infected with a begomovirus isolate. After 48 h of acquisition access period, inoculation was done using a 'Ring-cage', containing viruliferous whiteflies, attached to the abaxial side of the leaf of young tomato plants. 48 hours after acquisition, the whiteflies were eliminated and the inoculated plants were incubated for 28 days under greenhouse conditions. Three viruliferous whiteflies per plant were enough to cause infection in susceptible tomato cv. Viradoro. This procedure was applied to test the resistance of tomato line 486-1 (resistant line) in comparison with 'Viradoro' (susceptible cultivar). Dot blot hybridization confirmed the susceptibility of 'Viradoro' and the resistance of the line 486-1, showing the efficiency of this method for screening plants for disease resistance. This method is also a useful tool in detecting the presence of virus in inoculated (lower leaves) and in non-inoculated (upper leaves) in a given plant. Using this procedure, it was observed that the resistance of the line 486-1 probably is expressed in the inoculated leaf without virus translocation to the upper leaves.

O número de espécies de Begomovirus infectando tomateiro no Brasil aumentou significativamente após a introdução do vetor (Bemisia tabaci biótipo B). O locus Ty-1, derivado de Lycopersicon chilense, controla tolerância para isolados de Begomovirus de genoma monopartido pertencentes ao complexo do Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) que ocorre na Europa e Oriente Médio. No entanto, existe escassa informação a respeito da eficiência do locus Ty-1 contra as diferentes espécies do complexo de Begomovirus de genoma bipartido reportadas no Brasil. Híbridos heterozigotos (Ty-1/ty-1) e homozigotos (ty-1/ty-1) foram avaliados em campo aberto em duas regiões produtoras do Brasil Central. As condições experimentais foram de inóculo natural sob elevada densidade populacional de moscas-brancas virulíferas. A avaliação foi conduzida empregando um índice de severidade de sintomas (ISS) para descrever variando de 1= sem sintomas a 4= sintomas severos. A freqüência de infecção sistêmica foi avaliada via polymerase chain reaction (PCR) usando "primers universais" para detecção de espécies de Begomovirus. No ensaio 1, os híbridos heterozigotos (Ty-1/ty-1) e homozigotos (ty-1/ty-1) apresentaram 35% e 95% de plantas exibindo sintomas e 75% e 100% de plantas com PCR positivo para infecção sistêmica, respectivamente. No ensaio 2, observou-se apenas 20% da plantas do híbrido Ty-1/ty-1 sem sintomas virais, com ambos os híbridos apresentando 100% da plantas com PCR positivo. A resposta do híbrido contendo o locus Ty-1 foi similar à reportada para os begomovirus do grupo do TYLCV no Continente Europeu e Oriente Médio, tendo sido observada a presença de plantas sintomáticas e com multiplicação sistêmica do vírus. No entanto, em ambos os ensaios, a expressão de sintomas no híbrido heterozigoto foi mais suave que aquela apresentada pelos híbridos suscetíveis (ISS = 1,35 vs. 2,70 no ensaio 1 e ISS = 2,05 vs. 3,95, no ensaio 1). Análise da seqüência do DNA viral indicou a presença de isolados geneticamente relacionados à espécie Tomato rugose mosaic virus (ToRMV) no ensaio 2 e uma infecção mista de ToRMV e Tomato yellow vein streak virus (ToYVSV) no ensaio 2. Estes dados indicam que o locus Ty-1 confere uma reação do tipo "tolerância" contra distintas espécies de Begomovirus. Estreita ligação de genes de resistência e/ou tolerância a doenças é uma característica do genoma do tomateiro, especialmente no cromossomo 6 onde o locus Ty-1 está posicionado. Desta forma, estudos adicionais são necessários para demonstrar que a tolerância a distintos Begomovirus bipartidos é de fato conferida exclusivamente pelo locus Ty-1 ou pela presença de outros genes ligados.

The number of tomato-infecting begomoviruses has increased in Brazil after the introduction of the polyphagous vector Bemisia tabaci biotype B. The Ty-1 locus, introgressed from Lycopersicon chilense, controls tolerance to species of the monopartite Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) complex in Europe and the Middle East. However, little information is available about the Ty-1 effectiveness against species of the bipartite Begomovirus complex occurring in Brazil. Heterozygous (Ty-1/ty-1) and homozygous (ty-1/ty-1) hybrids were evaluated for reaction to Begomovirus isolates under open field conditions in two growing areas in Central Brazil. Test plants were evaluated under natural inoculation with high vector pressure. Evaluation was done using a disease assessment scale (DAS) varying from 1= no symptoms to 4= severe symptoms. Systemic infection was evaluated via polymerase chain reaction (PCR) using 'universal' Begomovirus primers. In the trial #1, the hybrids (Ty-1/ty-1) and (ty-1/ty-1) had 35% and 95% of plants with symptoms and 75% and 100% of plants with positive PCR, respectively. In the trial #2, only 20% of the Ty-1/ty-1 hybrid plants were symptom-free with both hybrids displaying 100% of plants with positive PCR. This reaction of the Ty-1 hybrid to bipartite Begomovirus species was similar to that reported in Europe and the Middle East to the TYLCV complex with a large number of plants being neither virus-free nor symptom-free. On the other hand, symptom expression of the Ty-1 hybrid was significantly milder than ty-1/ty-1 hybrids in both trials (DAS = 1.35 vs. 2.70 for the trial #1 and DAS = 2.05 vs. 3.95 for the trial #2). Nucleotide sequencing indicated the presence of isolates genetically related to Tomato rugose mosaic virus (ToRMV) in the trial #1 and a mixed infection of ToRMV and Tomato yellow vein streak virus in the trial #2. Therefore, the Ty-1 locus seems to control a "tolerance" response to distinct Begomovirus species. Resistance gene clusters is a common feature in the tomato genome, particularly at the chromosome 6 where Ty-1 is located. Therefore, additional studies are necessary to confirm if this tolerance to a range of begomoviruses is controlled by Ty-1 alone or a by the action of distinct, closely linked genes.

O Potato virus Y (PVY) tornou-se o maior problema nas áreas de produção de batata semente do Brasil. Somente as estirpes comum (PVYº) e necrótica (PVY N) eram detectadas infectando batata no Brasil. Esta situação mudou drasticamente a partir de 1997 quando um surto epidêmico de uma variante da estirpe necrótica de PVY causando arcos e anéis necróticos na superfície do tubérculo (PVY NTN) foi observado no país. Este estudo visou avaliar e validar uma metodologia de diferenciação de estirpes que causam necrose em tubérculos, proposta por Weilguny e Singh (1998). Vinte e oito isolados de PVY originários de tubérculos infectados de batata, provenientes de quatro estados brasileiros, foram analisados em sua reação em plantas de fumo, por Elisa, utilizando anti-soro policlonal e pelo método 3-primer RT-PCR. Quatro isolados induziram clareamento de nervuras e manchas peroladas em folhas de Nicotiana tabacum conforme esperado para a estirpe comum. Os 24 isolados restantes induziram necrose de nervuras neste hospedeiro portanto, classificados como da estirpe necrótica. Todos os 28 isolados de PVY reagiram positivamente contra o anti-soro policlonal de PVY por Elisa. Três métodos de extração de RNA foram testados, sendo que o método de hidrocloreto de guanidina mostrou-se o mais eficiente e de menor custo. Dos 28 isolados submetidos ao RT-PCR, um isolado de Santa Catarina e três do Rio Grande do Sul foram diferenciados como PVYº, confirmando os resultados do teste biológico. Um isolado de PVY N foi detectado no Estado de Santa Catarina e quatro no Rio Grande do Sul. O PVY NTN foi detectado em Minas Gerais (seis isolados), Santa Catarina (três isolados) e São Paulo (dez isolados). Estes resultados confirmam a presença dessa variante necrótica, PVY NTN, nas principais regiões produtoras de batata do Brasil.

The Potato virus Y (PVY) has become the major virus problem in seed potato growing areas of Brazil. Only necrotic and ordinary PVY strains were found infecting potatoes in Brazil. This situation drastically changed around 1997 when an epidemic of a PVY necrotic variant causing necrotic rings on the potato tuber surface was observed in the country. This study aimed to test the tuber necrotic strain differentiation method proposed by Weilguny & Singh (1998). Twenty eight PVY isolates originated from infected tubers and leaves from four Brazilian States were analyzed by host reaction after inoculation in tobacco, by ELISA using polyclonal antiserum and by the 3-primer RT-PCR method. The ordinary strain type isolates induced vein clearing and chlorotic pearl spots on Nicotiana tabacum leaves. All 24 remaining isolates inducing vein necrosis in leaves were classified as necrotic strains. All 28 PVY isolates positively reacted to PVY polyclonal antiserum by Elisa. Three RNA extraction methods were compared and the guanidine hydrochloride method was the most efficient and of the lowest cost. One isolate from Santa Catarina State and three from Rio Grande do Sul out of 28 PVY isolates submitted to RT-PCR method were differentiated as PVYº, confirming the biological test. One isolate of PVY N was detected from Santa Catarina and four from Rio Grande do Sul State. The PVY NTN was detected in Minas Gerais (six isolates), Santa Catarina (three isolates) and São Paulo (ten isolates). These results confirmed the presence of this new variant, PVY NTN in the main potato growing areas of Brazil.